高速匀浆机均质化阶段的目的是产生稳定的乳化,分散和混合。均质化可增加微粒和液滴的细分和其表面积,甚至可以通过降低反应时间和温度,改良化学的反应过程,并且减少或甚至不用催化剂。高的均质化压力的应用在许多色素、染料和油漆工业领域,可以提高生产过程和使色彩更加鲜艳。均质化在石油化工工业中,可以优化添加剂的混合和粘度控制。高速匀浆机将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10~15分钟,若检测ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。 高速匀浆机旋转速度*,每分钟达到12000转,物料在玻璃杯中通过电机旋转驱动旋刀同时进行劈裂、碾碎、掺合等过程,使物料搅拌捣碎。机器体积小,消耗功率少,工作效率高,但对黏度高的液体同质料硬的物性(如骨头等)均不可用。浆的方式有多种:手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆、反复冻融。 手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,高速匀浆机再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),高速匀浆机充分研碎,使组织匀浆化。 机器匀浆:用组织研磨机(OMNIBead Ruptor 24 多样品研磨珠均质仪) 6m/s研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(Omni Prep 多样品均质仪 )匀浆时间20秒/次,间隙10秒,连续3-5次。 超声粉碎:高速匀浆机用超声波细胞破碎仪(OMNI Sonic Ruptor400W)进行破碎,可用以振幅12.7mm超声处理30秒使细胞破碎. 反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右),但有部分酶活力会受影响。 高速匀浆机取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数。为了不损坏发动机,每次使用起动马达不要超过30秒,在每次起动后,至少要等候2分钟(词要求仅对发动机马达而言)如果再15秒内报警灯亮起,或机油压力表上无机油压力,表示机油压力太低。这时立即关闭高速匀浆机发动机以避免发动机损坏。确认在油底壳中的机油油位是否正确。 |